GGPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404003

Visão geral

GGPS1 codifica a geranilgeranil difosfato sintase 1, uma enzima-chave da via do mevalonato que produz geranilgeranil difosfato (GGPP), um precursor lipídico isoprenoide essencial. O GGPP sustenta a prenilação de proteínas, permitindo a associação à membrana e a atividade de sinalização de pequenas GTPases, como membros das famílias RAS, RHO e RAB, influenciando assim o tráfego vesicular, a dinâmica do citoesqueleto e a proliferação. Ao regular o fluxo de isoprenoides e a capacidade de prenilação, GGPS1 contribui para o controle metabólico de processos mitocondriais e associados ao retículo endoplasmático (RE) e se interliga à biossíntese de colesterol e dolicol. A desregulação do eixo mevalonato–prenilação e a atividade alterada de GGPS1 têm sido associadas a dependências de sinalização oncogênica e a outros distúrbios que envolvem o metabolismo lipídico e o tráfego de proteínas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GGPS1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GGPS1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GGPS1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GGPS1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GGPS1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GGPS1 para a investigação da sinalização de GGPS1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GGPS1 críticos para a função GGPS1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GGPS1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GGPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GGPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GGPS1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GGPS1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GGPS1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GGPS1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GGPS1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.