GAS41 Plasmide Double Nickase (h): sc-404113-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GAS41 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GAS41 Double Nickase Plasmid (h) e il GAS41 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira YEATS4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: GAS41 Antibody (C-10): sc-393708
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GAS41 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404113-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GAS41 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404113-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
YEATS4 codifica GAS41, una proteina nucleare contenente un dominio YEATS che funge da regolatore della trascrizione e dell’organizzazione del genoma associato alla cromatina. GAS41 partecipa al rimodellamento della cromatina e a processi legati all’acetilazione degli istoni attraverso interazioni con complessi quali SRCAP/TIP60, sostenendo la dinamica dei nucleosomi, il controllo trascrizionale e le risposte della cromatina associate al danno al DNA. Influenzando la progressione del ciclo cellulare e i programmi di espressione genica, YEATS4/GAS41 è stato collegato a fenotipi proliferativi e a variazioni del numero di copie genomiche riportate in diversi tipi di tumore. Queste caratteristiche rendono YEATS4 un bersaglio utile per studiare la regolazione epigenetica, la segnalazione dipendente dalla cromatina e le reti trascrizionali rilevanti per il cancro nelle cellule umane.
GAS41 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus YEATS4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di YEATS4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di YEATS4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con YEATS4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.