galectin-9 Plasmídeo de ativação de CRISPR (m): sc-421420-ACT

O gene murino **Lgals9** codifica a **galectina-9**, uma lectina ligante de β-galactosídeos que regula as interações célula–célula e célula–matriz por meio do reconhecimento, dependente de glicanos, de glicoconjugados presentes na superfície celular e na matriz extracelular. A galectina-9 contribui para a sinalização imune e para a regulação inflamatória ao modular a ativação de leucócitos, programas de citocinas e o tráfego tecidual, com efeitos a jusante em vias associadas à biologia de checkpoints imunológicos e à transcrição responsiva ao estresse. Ela também influencia adesão, migração e apoptose, processos que moldam a dinâmica tumor–sistema imune e microambientes crônicos inflamatórios. A expressão desregulada de **LGALS9/galectina-9** tem sido associada à autoimunidade, à imunopatologia de doenças infecciosas e à biologia do câncer, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de imunologia e de microambiente.

galectin-9 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de Lgals9 sem alterar a sequência de ADN subjacente.

galectin-9 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus Lgals9 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição Lgals9, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de galectin-9. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus Lgals9 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de galectin-9 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via galectin-9 em células tumorais com expressão de Lgals9 silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.