galectin-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421418

概要

マウスのLgals6は、β-ガラクトシド結合性レクチンであるガレクチン6をコードしており、細胞表面および細胞外環境における糖鎖依存的な認識イベントに関与するとされています。ガレクチンファミリーの一員として、ガレクチン6は細胞—細胞間および細胞—マトリックス間相互作用、糖タンパク質ラティスの組織化、さらに上皮バリア機能の制御や免疫細胞シグナル伝達といった下流過程に影響を与え得ます。ガレクチンによって駆動される経路は、糖鎖修飾された受容体や細胞外マトリックス成分との相互作用を介して、炎症の調節、白血球の動員、組織リモデリングの制御に結び付くことが一般的です。レクチン—糖鎖シグナルの破綻は、複数の組織における炎症性・線維化表現型と関連付けられており、Lgals6は粘膜免疫生物学および微小環境制御の機序研究における重要な標的となります。

galectin-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるLgals6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Lgals6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Lgals6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、galectin-6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、galectin-6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Lgals6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• galectin-6の機能に不可欠なLgals6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Lgals6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• galectin-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびgalectin-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Lgals6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  galectin-6 HDRプラスミド（m）および galectin-6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLgals6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLgals6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。