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GABAB R1双切口酶质粒(h) | sc-401714-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAB R1双切口酶质粒(h2) | sc-401714-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABBR1 编码人类 GABA\_B 受体亚基 1(GABA\_B R1),它是介导中枢神经系统缓慢抑制性神经传递的异源二聚体 G 蛋白偶联受体的必需组成部分。受体被激活后,GABA\_B 信号与 G\_i/o 蛋白偶联,从而抑制腺苷酸环化酶、调控 cAMP/PKA 通路、调节钙/钾通道活性,并在突触前与突触后位点抑制神经递质释放。该通路影响神经元兴奋性、突触可塑性及网络振荡,使 GABBR1 与塑造神经环路功能的机制相关联。GABA 能抑制张力的改变以及 GABA\_B 受体信号的失调,已在神经系统疾病与神经精神表型的研究背景下被广泛探讨,这也支持使用 GABBR1 扰动模型开展机制研究。
GABAB R1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GABBR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GABBR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GABBR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GABBR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。