GABAA Rδ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401954-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GABAA RδO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GABAA Rδ (h) e o Plasmídeo Double Nickase GABAA Rδ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GABRD. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GABAA Rδ Anticorpo (H-4): sc-271231
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GABAA Rδ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401954-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAA Rδ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401954-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRD codifica a subunidade δ do recetor humano GABA_A (GABA_A Rδ), um canal de cloreto inibitório ativado por ligando que contribui de forma proeminente para recetores extrasinápticos que medeiam a inibição tónica nos neurónios. Ao moldar a excitabilidade da membrana e a integração sináptica, os recetores GABA_A contendo δ influenciam as oscilações de rede e o equilíbrio da neurotransmissão nas vias de sinalização GABAérgica. A expressão de GABRD e a composição do recetor são reguladas de perto durante o desenvolvimento e em resposta a neuroesteroides, ligando esta subunidade à plasticidade dependente da atividade. Alterações na função ou na expressão da subunidade δ têm sido associadas a fenótipos neurológicos e neuropsiquiátricos, sustentando a sua relevância para estudos mecanísticos da sinalização inibitória e da disfunção de circuitos.
GABAA Rδ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GABRD em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GABRD. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GABRD. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GABRD interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.