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GABAA Rα5双切口酶质粒(h) | sc-402696-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAA Rα5双切口酶质粒(h2) | sc-402696-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRA5 编码人类 GABA\_A 受体的 α5 亚基。GABA\_A 受体是一种配体门控的氯离子通道,在中枢神经系统中介导抑制性神经传递。含 α5 的受体在突触外位点更为富集,并参与张力性抑制;其通过维持氯离子稳态及 GABA 能信号传导来塑造神经元兴奋性、突触整合与可塑性。该亚基参与活动依赖性的网络调控,并在功能上与调控学习和记忆环路的通路相互交叉。α5 亚基相关的 GABA\_A 受体信号失调与多种神经精神和神经发育表型有关,因此可作为研究抑制性环路功能机制的有力工具。
GABAA Rα5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GABRA5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GABRA5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GABRA5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GABRA5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。