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GABAA Rα2双切口酶质粒(h) | sc-402715-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAA Rα2双切口酶质粒(h2) | sc-402715-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRA2 编码人类 GABA\(_A\) 受体 α2 亚基,它是由五个亚基组成的配体门控氯离子通道的核心成分,介导中枢神经系统快速的抑制性神经传递。通过调控氯离子电导,GABA\(_A\)Rα2 影响神经元兴奋性、突触整合以及网络振荡,因此与活动依赖性的环路功能以及兴奋–抑制平衡密切相关。该受体亚基参与 GABA 能突触信号传导,并与调控受体定位与去敏化的支架蛋白及转运机制相互作用。GABRA2 的遗传与调控变异与多种神经精神及神经系统表型相关,支持其在神经元模型中开展机制研究的意义。
GABAA Rα2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GABRA2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GABRA2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GABRA2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GABRA2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。