G3BP2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-403630-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- G3BP2 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- G3BP2ダブルニカースプラスミド（h）およびG3BP2ダブルニカースプラスミド（h2）は、G3BP2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
G3BP2 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-403630-NIC | 20 µg | $410.00 |
G3BP2（G3BPストレス顆粒形成因子2）はRNA結合タンパク質であり、ストレス顆粒の形成を開始する主要な核形成因子として機能するとともに、細胞ストレス下におけるmRNAの安定性および翻訳を制御します。MAPKシグナルや自然免疫シグナルに関連する転写後遺伝子制御に関与し、酸化ストレス、ウイルス感染、タンパク質毒性（プロテオトキシック）条件に対する細胞の適応の仕方に影響を与えます。RNAやリボ核タンパク質複合体との相互作用を介して、G3BP2はストレス応答に伴うトランスクリプトームおよびプロテオームの再編成を協調的に調節します。G3BP2活性の破綻やストレス顆粒ダイナミクスの異常は、がん生物学、神経変性、宿主—病原体応答などの文脈で研究されており、細胞運命や炎症性シグナルの機序研究において重要な標的となっています。
G3BP2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における G3BP2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、G3BP2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、G3BP2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、G3BP2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。