Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Furin Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422141-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FurinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Furin (m) e o Plasmídeo Double Nickase Furin (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Furin. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Furin Anticorpo (B-6): sc-133142
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Furin Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422141-NIC | 20 µg | $410.00 |
A furina (PCSK3) é uma convertase de proproteínas dependente de cálcio que processa proteínas precursoras, convertendo-as em formas maduras e bioativas ao longo da via secretória, incluindo a rede trans-Golgi e compartimentos endossomais. Ao clivar substratos com motivos básicos, regula a maturação de hormonas, fatores de crescimento, recetores e metaloproteinases, influenciando assim cascatas de sinalização como TGF-β/BMP, Notch e a remodelação da matriz extracelular. Em sistemas murinos, a atividade da furina molda a padronização do desenvolvimento, as respostas imunitárias e inflamatórias e a comunicação célula–célula, através da proteólise controlada de proteínas de membrana e secretadas. A desregulação do processamento dependente de furina tem sido associada na literatura a alterações da homeostase tecidular e à fisiopatologia, sustentando a sua utilização como um nó mecanístico em estudos de sinalização impulsionada por proteases e de proteostase.
Furin O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Furin em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Furin. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Furin. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Furin interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.