Fucokinase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409449-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FucokinaseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Fucokinase (h) e o Plasmídeo Double Nickase Fucokinase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FUK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Fucokinase Anticorpo (F-9): sc-377371
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Fucokinase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409449-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Fucokinase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-409449-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano FUK codifica a fucocinase, uma quinase citosólica que fosforila a L-fucose livre para L-fucose-1-fosfato, iniciando a via de salvamento que fornece GDP-L-fucose para a fucosilação celular. Essa atividade sustenta a maturação de glicanos em glicoproteínas e glicolipídios, influenciando a sinalização de receptores, o reconhecimento célula–célula e a adesão por meio da regulação de epítopos fucosilados. Ao controlar o fluxo pela via de salvamento da fucose, a FUK contribui para um metabolismo mais amplo de açúcares nucleotídicos e se interconecta funcionalmente com processos dependentes de fucosiltransferases do Golgi. Padrões alterados de fucosilação são amplamente estudados em contextos como inflamação, biologia do câncer e distúrbios congênitos da glicosilação, tornando a FUK um ponto útil para estudos mecanísticos da regulação do glicoma.
Fucokinase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FUK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FUK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FUK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FUK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.