FRRS1L CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407611

概要

FRRS1L（ferric chelate reductase 1 like）は、小胞体に関連するタンパク質をコードしており、AMPA型グルタミン酸受容体の生合成および機能調節に関与することで、興奮性シナプス伝達や神経回路ネットワーク活動に影響を及ぼします。FRRS1Lは、受容体の組み立て、輸送、細胞表面への発現を制御する過程に関与し、その結果、シナプス可塑性に関連するシグナル伝達経路にも影響します。FRRS1L機能の破綻は、神経発達異常やてんかん様表現型と関連づけられており、シナプス病（synaptopathy）や活動依存的な神経機能障害の機序を研究する上で重要です。神経細胞での高い発現とグルタミン酸作動性シグナル伝達における役割から、受容体恒常性の変化が回路レベルに及ぼす影響をモデル化する用途にも適しています。

FRRS1L CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFRRS1L遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FRRS1L内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FRRS1Lのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FRRS1Lタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FRRS1Lシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FRRS1L欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FRRS1Lの機能に不可欠なFRRS1Lエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FRRS1Lゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FRRS1L CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFRRS1L CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FRRS1L遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FRRS1L HDRプラスミド（h）および FRRS1L HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFRRS1Lホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFRRS1L標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。