frizzled-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420437
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- frizzled-7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico frizzled-7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
frizzled-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420437 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Fzd7 de camundongo codifica a frizzled-7, um receptor de Wnt com sete domínios transmembrana que converte ligantes Wnt extracelulares em respostas de sinalização intracelular. A frizzled-7 regula programas transcricionais dependentes de β-catenina, bem como vias não canônicas de polaridade celular planar e Wnt/Ca²⁺, influenciando proliferação, polaridade, migração e decisões de destino celular durante o desenvolvimento e a homeostase tecidual. Alterações na sinalização de Fzd7 têm sido associadas a comportamento desregulado de células-tronco/progenitoras e à ativação de vias oncogênicas em diversos modelos experimentais, tornando-o um ponto de entrada útil para dissecar o controle da rede Wnt. Em sistemas celulares, a perturbação de Fzd7 é comumente utilizada para investigar a especificidade da sinalização Wnt ao nível do receptor e a interação (crosstalk) com processos associados a receptores tirosina-quinase e às vias Hippo/YAP.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO frizzled-7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Fzd7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Fzd7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Fzd7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína frizzled-7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Fzd7 para a investigação da sinalização de frizzled-7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Fzd7 críticos para a função frizzled-7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Fzd7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo frizzled-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo frizzled-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Fzd7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo frizzled-7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR frizzled-7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Fzd7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Fzd7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.