FOXP3 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400542-LAC

FOXP3 codifica um fator de transcrição do tipo forkhead/winged-helix que atua como regulador mestre do comprometimento de linhagem e da função supressora das células T reguladoras (Treg). Ao coordenar programas transcricionais que modulam a sinalização por citocinas, a ativação mediada pelo receptor de células T e as vias de checkpoints imunológicos, o FOXP3 ajuda a manter a tolerância imunológica periférica e a conter a inflamação excessiva. A expressão ou atividade desregulada de FOXP3 está associada à estabilidade prejudicada das Treg e a respostas imunes aberrantes, tornando-o um nó central para o estudo da homeostase imune. O FOXP3 também é usado como marcador molecular em pesquisas de imunologia para investigar a diferenciação de Treg, a remodelação do estado da cromatina e redes transcricionais associadas a doenças inflamatórias.

As Partículas de Ativação Lentivirais FOXP3 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de FOXP3 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais FOXP3 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição FOXP3, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de FOXP3. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo FOXP3 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.