FMNL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406244
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FMNL3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FMNL3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FMNL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406244 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FMNL3 (proteína 3 semelhante à formina) é um fator de nucleação e elongação de actina regulado por GTPases da família Rho, que coordena a remodelação do citoesqueleto cortical de actina. Ela dá suporte à formação de filopódios e lamelipódios, regula a polaridade celular e contribui para a migração direcionada por vias ligadas à sinalização de CDC42/RAC e à dinâmica do citoesqueleto. A atividade de FMNL3 influencia a protrusão de membrana, a renovação de adesões e processos de tráfego intracelular que dependem da montagem de actina. A expressão ou sinalização desregulada de FMNL3 tem sido associada a fenótipos relevantes para invasão e metástase de células tumorais em múltiplos sistemas modelo, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos de motilidade e controle do citoesqueleto.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FMNL3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FMNL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FMNL3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FMNL3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FMNL3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FMNL3 para a investigação da sinalização de FMNL3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FMNL3 críticos para a função FMNL3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FMNL3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FMNL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FMNL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FMNL3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FMNL3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FMNL3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FMNL3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FMNL3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.