FMNL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404817-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FMNL1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FMNL1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FMNL1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FMNL1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FMNL1 Anticorpo (C-5): sc-390023
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FMNL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404817-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FMNL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404817-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A proteína semelhante à formina 1 (FMNL1) é um fator de nucleação e elongação de actina da família de forminas relacionadas à diaphanous, que promove a montagem e a remodelação de filamentos por meio de seus domínios FH1/FH2. Ela é altamente expressa em linhagens hematopoéticas e dá suporte a processos do citoesqueleto, incluindo polarização celular, adesão e migração direcionada, conectando a sinalização de GTPases da família Rho à organização dinâmica de actina. A função de FMNL1 contribui para o tráfego de células imunes e para interações fagocíticas ou do tipo sinapse ao coordenar estruturas protrusivas e redes de actina associadas à membrana. A expressão ou sinalização desregulada de FMNL1 tem sido associada a alterações no comportamento de leucócitos e foi relatada em múltiplos contextos de neoplasias hematológicas e tumores sólidos, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de invasão, regulação imune e fenótipos dependentes do citoesqueleto.
FMNL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FMNL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FMNL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FMNL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FMNL1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.