Partículas Lentivirales de Activación (h) FKBPL: sc-410504-LAC

El gen humano **FKBPL** codifica la proteína tipo FK506-binding (FKBPL), una inmunofilina atípica que actúa como cocaperona de **HSP90** y como regulador de andamiaje de proteínas de señalización implicadas en la proteostasis, el control del ciclo celular y las respuestas al estrés. Mediante mecanismos dependientes de chaperonas, FKBPL influye en el plegamiento y la estabilidad de las proteínas y se ha vinculado a la regulación de la señalización de receptores de esteroides y de vías conectadas con respuestas inflamatorias mediadas por **NF-κB**. Se han descrito alteraciones en la expresión de FKBPL en múltiples contextos patológicos, incluidos fenotipos asociados al cáncer como la proliferación, las respuestas al daño del ADN y programas relacionados con la angiogénesis, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico para la interrogación de vías. Estas características hacen de FKBPL una diana relevante para desentrañar redes de chaperonas, regulación transcripcional y señalización de estrés dependiente del contexto en modelos celulares humanos.

Las partículas de activación lentiviral FKBPL (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de FKBPL en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral FKBPL (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción FKBPL, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de FKBPL. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo FKBPL y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.