FGF-23 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425719
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FGF-23 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FGF-23, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FGF-23 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425719 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O fator de crescimento de fibroblastos 23 (FGF-23), codificado pelo gene murino *Fgf23*, é um FGF endócrino produzido predominantemente por osteócitos e osteoblastos, que mantém o equilíbrio sistêmico de fosfato e vitamina D. Atuando por meio de FGFRs de maneira dependente de Klotho, o FGF-23 suprime a reabsorção renal de fosfato e modula o metabolismo da vitamina D, coordenando assim a homeostase de íons minerais com a remodelação óssea. A desregulação da sinalização de FGF-23 está associada a alterações no manejo de fosfato, defeitos de mineralização esquelética e mudanças secundárias nas vias do hormônio paratireoideo e da vitamina D, o que o torna um nó central na comunicação endócrina osso–rim. Como regulador do metabolismo mineral associado a biomarcadores, *Fgf23* é amplamente estudado em modelos de desordens da homeostase do fosfato e da fisiologia óssea e renal relacionada.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FGF-23 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Fgf23 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Fgf23, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Fgf23 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FGF-23.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Fgf23 para a investigação da sinalização de FGF-23, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Fgf23 críticos para a função FGF-23
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Fgf23 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FGF-23 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo FGF-23 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Fgf23. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FGF-23 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR FGF-23 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Fgf23 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Fgf23 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.