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FcRn慢病毒激活颗粒(h) | sc-400689-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 FCGRT 编码新生儿 Fc 受体(FcRn),这是一种类似 MHC I 类的异源二聚体,可在 pH 依赖性条件下与 IgG 的 Fc 片段以及血清白蛋白结合,从而调控它们的细胞内转运与体内半衰期。FcRn 主要在内体分选通路中发挥作用,决定配体是被回收再利用还是被送往溶酶体降解,进而塑造全身性抗体稳态与黏膜免疫。通过这些细胞内运输过程,FcRn 影响抗原处理以及免疫球蛋白在极化上皮中的分布,使 FCGRT 的活性与免疫调控及炎症性疾病的生物学机制相联系。在实验模型中,研究者常通过改变 FcRn 的功能或表达水平来探究异常 IgG 持续存在、自身抗体负荷以及免疫复合物驱动的病理机制。
FcRn 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 FCGRT 表达。
FcRn 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在FCGRT转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性FcRn表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 FCGRT 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。