FAPα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401511-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FAPαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FAPα (h) e o Plasmídeo Double Nickase FAPα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FAP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FAPα Anticorpo (SS-13): sc-100528
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FAPα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401511-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FAPα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401511-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A proteína alfa de ativação de fibroblastos (FAPα) é uma serina protease transmembranar do tipo II da família S9B de dipeptidil peptidases, com atividade tanto de dipeptidil peptidase quanto de endopeptidase. É expressa de forma proeminente por fibroblastos ativados e por populações estromais e contribui para a remodelação da matriz extracelular por meio da clivagem de substratos ricos em prolina, influenciando as interações célula–matriz, a adesão e o comportamento migratório. A atividade da FAPα se cruza com programas de sinalização estromal que regulam a remodelação tecidual e microambientes inflamatórios, incluindo vias ligadas a estados de ativação de fibroblastos. Alterações na expressão de FAP são frequentemente associadas à remodelação fibrótica e ao estroma associado a tumores, tornando-a um marcador útil e um nó funcional para estudar a regulação do microambiente em contextos de doença humana.
FAPα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FAP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FAP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FAP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FAP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.