FAM208A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405884

概要

FAM208Aは核内タンパク質をコードしており、転写制御やゲノム維持に影響するクロマチン関連プロセスに関与します。多タンパク質性の核内複合体との相互作用を介して、DNA損傷応答経路やエピジェネティック制御との関連が示されており、適切な細胞周期進行やストレス適応を支えます。FAM208Aが関与するクロマチン構造の調節や修復の正確性（忠実度）の破綻は、がんやその他の増殖性疾患で観察されるゲノム不安定性の表現型に寄与する可能性があります。主として核内に局在することから、ヒト細胞においてクロマチン状態と遺伝子発現、ならびにDNA修復の帰結を結び付ける機構を解析するうえで有用な標的となります。

FAM208A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFAM208A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FAM208A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FAM208Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAM208Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAM208Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FAM208A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAM208Aの機能に不可欠なFAM208Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FAM208Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAM208A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFAM208A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FAM208A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAM208A HDRプラスミド（h）および FAM208A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFAM208Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFAM208A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。