FAM148C CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414279

概要

C2CD4C（FAM148C）は、C2ドメインを含むタンパク質をコードしており、カルシウム依存的な膜関連シグナル伝達や、細胞内膜上でのタンパク質間相互作用の調節に関与すると考えられています。近年の機能アノテーションからは、FAM148Cが小胞輸送、細胞骨格ダイナミクス、刺激応答性の転写プログラムを統合的に制御する経路と関連し、細胞増殖や代謝恒常性に影響を及ぼす可能性が示唆されています。遺伝学的研究ではC2CD4C座位の多型が血糖関連形質や2型糖尿病リスクと関連づけられており、膵島機能やより広範な内分泌シグナル伝達ネットワークにおける役割の解明が支持されています。これらの特徴により、FAM148Cはヒト細胞モデルにおけるシグナル統合の機構解析や、遺伝型から表現型への関係を検討する研究に有用な標的となります。

FAM148C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるC2CD4C遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、C2CD4C内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、C2CD4Cのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAM148Cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAM148Cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、C2CD4C欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAM148Cの機能に不可欠なC2CD4Cエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、C2CD4Cゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAM148C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFAM148C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、C2CD4C遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAM148C HDRプラスミド（h）および FAM148C HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはC2CD4Cホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のC2CD4C標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。