FAM122A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426886

概要

Fam122aは、保存性の高い制御タンパク質FAM122Aをコードしており、特にPP2A複合体の調節を介してセリン／スレオニンホスファターゼ活性の制御に関与すると示唆されています。PP2A依存的な脱リン酸化に影響を与えることで、FAM122Aは細胞周期の進行、DNA損傷応答、ならびにより広範なプロテオスタシス・ネットワークに結び付く、リン酸化駆動型のシグナル伝達プログラムに作用し得ます。PP2A制御の破綻は、増殖制御やストレスシグナルの変容と広く関連しているため、Fam122aはホスファターゼ中心の経路を機構的に研究する上で有用な標的となります。マウス系では、Fam122aの機能撹乱により、リン酸化恒常性が疾患関連のシグナル伝達異常に関わる細胞表現型をどのように形成するかを検討できます。

FAM122A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるFam122a遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Fam122a内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Fam122aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAM122Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAM122Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Fam122a欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAM122Aの機能に不可欠なFam122aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Fam122aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAM122A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびFAM122A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Fam122a遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAM122A HDRプラスミド（m）および FAM122A HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFam122aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFam122a標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。