非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
因子 IX 抗体 (B-3): sc-377187. 未转染 (A) 和转染人因子 IX (B) 的 293T 全细胞裂解液中因子 IX 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Factor IX CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402469
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Factor IX CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Factor IX基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Factor IX: sc-377187，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Factor IX CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-402469 | 20 µg | $397.00 |
概述
人类 F9 基因编码凝血因子 IX，这是一种维生素 K 依赖性的丝氨酸蛋白酶酶原，可被激活为因子 IXa，并在血液凝固的内源性途径中发挥作用。因子 IXa 在磷脂表面与因子 VIIIa 形成复合物后，可催化因子 X 的激活，从而促进凝血酶生成和纤维蛋白血栓形成。F9 的活性受翻译后 γ-羧化以及钙依赖性的膜结合调控，使其与肝脏蛋白加工过程及细胞外蛋白水解级联反应相联系。F9 的破坏或功能缺陷与遗传性出血表型相关，并常被用于研究凝血网络的调控机制以及蛋白酶与辅因子之间的相互作用。
Factor IX CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中F9基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对F9基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏F9开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Factor IX蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建F9缺失的细胞模型，用于Factor IX信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Factor IX 功能至关重要的 F9 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 F9 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Factor IX CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Factor IX CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 F9 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Factor IX HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Factor IX HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由F9同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定F9靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。