F4/80 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420168

概要

Adgre1は、マウスのF4/80抗原（EMR1）をコードしており、組織常在性マクロファージおよび関連する骨髄系細胞集団で顕著に発現する、EGF-TM7ファミリーに属する接着型Gタンパク質共役受容体（GPCR）です。F4/80はマクロファージサブセットの同定に一般的に用いられており、細胞間相互作用や環境シグナルの感知を介して、マクロファージの分化、組織局在、免疫恒常性の制御に関与することが示唆されています。その発現パターンは、組織微小環境における自然免疫活性化、抗原提示、炎症性サイトカインネットワークを制御する経路とも交差しています。Adgre1/F4/80の発現に関連したマクロファージの量的変化や極性化は、炎症性疾患、代謝性疾患、感染症研究、神経炎症、ならびに腫瘍随伴マクロファージ（TAM）生物学の分野で頻繁に研究されています。

F4/80 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAdgre1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Adgre1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Adgre1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、F4/80タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、F4/80シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Adgre1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• F4/80の機能に不可欠なAdgre1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Adgre1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• F4/80 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびF4/80 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Adgre1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  F4/80 HDRプラスミド（m）および F4/80 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAdgre1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAdgre1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。