EYA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403115-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EYA2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EYA2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EYA2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EYA2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EYA2 Anticorpo (F-18): sc-100325
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EYA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403115-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EYA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403115-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EYA2 codifica o homólogo 2 de Eyes Absent, um coativador transcricional multifuncional e uma fosfatase do tipo haloacid dehalogenase, que regula programas de expressão gênica envolvidos no desenvolvimento e na homeostase. Por meio de interações com fatores de transcrição da família SIX e da modulação dos estados de fosforilação em tirosina, a EYA2 contribui para decisões de destino celular, proliferação, migração e sinalização associada a danos no DNA. Redes relacionadas à EYA2 se cruzam com vias de organogênese e circuitos de controle transcricional que moldam fenótipos epiteliais e mesenquimais. Expressão ou atividade desregulada de EYA2 tem sido relatada em múltiplos contextos associados a doenças, tornando-a um alvo útil para dissecar o redirecionamento de vias e as relações genótipo–fenótipo em modelos de células humanas.
EYA2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EYA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EYA2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EYA2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EYA2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.