Exo1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402356-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Exo1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Exo1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Exo1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EXO1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Exo1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402356-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Exo1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402356-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EXO1 codifica a Exo1, uma exonuclease 5′→3′ específica de estruturas, que participa na resecção das extremidades do DNA durante a recombinação homóloga e no processamento de forquilhas de replicação bloqueadas. Também contribui para a reparação de erros de emparelhamento (mismatch repair), coordenando-se com componentes da via MutS/MutL para excisar DNA mal emparelhado, mantendo assim a estabilidade do genoma. Por meio dessas atividades, a EXO1 influencia a sinalização de checkpoints do ciclo celular, as respostas ao stress de replicação e a resolução de intermediários de recombinação. Alterações na função ou na expressão de EXO1 têm sido associadas a fenótipos mutadores e à instabilidade genómica observada em múltiplos contextos relacionados com o cancro, sustentando a sua utilidade como um nó mecanístico na investigação da reparação do DNA.
Exo1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EXO1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EXO1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EXO1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EXO1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.