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EVA1B慢病毒激活颗粒(h) | sc-412477-LAC | 200 µl | $455.00 |
EVA1B(亦称 TMEM166L)编码一种与内质网相关的小型跨膜蛋白,被认为参与自噬与凋亡的调控;自噬与凋亡是协调蛋白质稳态、应激适应以及生存/死亡决策的关键细胞程序。EVA1B 还与膜运输和细胞器稳态相关,这些过程与未折叠蛋白反应(UPR)信号以及线粒体完整性相互交叉。在多种与疾病相关的情境中均有报道 EVA1B 表达发生改变,包括与癌症相关的表型,以及炎症或神经生物学相关的转录特征,支持其在通路研究中作为标志物或调节因子的用途。研究 EVA1B 有助于阐明应激反应性的细胞死亡与自噬通量如何促成细胞适应度与信号网络在不同情境下的变化。
EVA1B 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 EVA1B 表达。
EVA1B 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在EVA1B转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性EVA1B表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 EVA1B 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。