ETAR Lentiviral Activation Particles (h): sc-401000-LAC

EDNRA kodiert den Endothelin-Rezeptor Typ A (ETAR), einen G‑Protein-gekoppelten Rezeptor, der Endothelin‑1 bindet und dadurch die Kontraktion glatter Gefäßmuskelzellen sowie die übergeordnete kardiovaskuläre Homöostase reguliert. Nach Ligandenbindung signalisiert ETAR vorwiegend über Gαq/11 und aktiviert die Phospholipase C, wodurch intrazelluläres Ca2+ ansteigt und PKC stimuliert wird; zusätzlich besteht eine Kopplung an MAPK/ERK‑ und RhoA/ROCK‑Signalwege, die Proliferation, Migration und den Umbau der extrazellulären Matrix beeinflussen. EDNRA‑vermittelte Signalgebung greift zudem in entzündungs- und hypoxieassoziierte Programme ein, die die Kommunikation zwischen Endothel und glatter Muskulatur modulieren. Eine fehlregulierte ETAR‑Aktivität und ein Ungleichgewicht der Endothelin‑Achse werden mit Gefäßdysfunktion und Remodeling‑Prozessen in Verbindung gebracht, was EDNRA als mechanistischen Knotenpunkt für die Analyse von Signalwegen in relevanten Zellmodellen unterstützt.

ETAR Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente EDNRA-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ETAR Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der EDNRA-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ETAR-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen EDNRA-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.