Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
eRF3a/b Antibody (B-8): sc-515615. Western blot analysis of eRF3a/b expression in HeLa (A), Jurkat (B), K-562 (C) and Hep G2 (D) whole cell lysates and mouse brain tissue extract (E).
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eRF3a CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-404748
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- eRF3a CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在eRF3a基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
eRF3a CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-404748 | 20 µg | $397.00 |
概述
GSPT1 编码真核翻译释放因子 3a（eRF3a），这是一种与核糖体相关的 GTP 酶，可与 eRF1 协同作用，在识别终止密码子后推动翻译终止并促进核糖体再循环。通过受调控的 GTP 水解，以及与 poly(A) 结合蛋白和其他翻译因子的相互作用，eRF3a 有助于协调 mRNA 监控、蛋白质稳态（proteostasis）以及蛋白质合成的准确性。翻译终止及 RNA 质量控制通路的调控异常与细胞生长程序失衡和应激反应有关，因此 GSPT1 是研究翻译调控如何与信号传导及稳态网络衔接的一个有价值的节点。在生物医学研究中，扰动 eRF3a 可用于探究终止密码子读穿、无义介导的 mRNA 降解（NMD）耦联机制，以及因蛋白质组维护受损而出现的脆弱性。
eRF3a CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中GSPT1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对GSPT1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏GSPT1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使eRF3a蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建GSPT1缺失的细胞模型，用于eRF3a信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 eRF3a 功能至关重要的 GSPT1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 GSPT1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 eRF3a CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 eRF3a CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 GSPT1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 eRF3a HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 eRF3a HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由GSPT1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定GSPT1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。