ErbB2/HER2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400138-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- ErbB2/HER2 as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- ErbB2/HER2 As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo ErbB2/HER2 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo ErbB2/HER2 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor ERBB2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: ErbB2/HER2 Anticorpo (3B5): sc-33684
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ErbB2/HER2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-400138-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
ErbB2/HER2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h2) | sc-400138-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
ERBB2 codifica o receptor tirosina-quinase ErbB2/HER2, um membro órfão de ligante da família EGFR/ErbB que atua como parceiro preferencial de heterodimerização para amplificar a sinalização por fatores de crescimento. Após a dimerização, o HER2 ativa as cascatas PI3K–AKT–mTOR e RAS–RAF–MEK–ERK a jusante, coordenando programas de proliferação, sobrevivência, diferenciação e metabolismo. A sinalização de ERBB2 também se conecta às redes de SRC/FAK e de adesão célula–célula, influenciando a dinâmica do citoesqueleto e o comportamento migratório. A expressão desregulada de ERBB2 ou a hiperativação da via está fortemente associada à transformação oncogênica e é amplamente estudada como impulsionadora da aptidão tumoral e da plasticidade de sinalização das células tumorais em múltiplos contextos teciduais.
As Partículas de Ativação Lentivirais ErbB2/HER2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de ERBB2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais ErbB2/HER2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição ERBB2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de ErbB2/HER2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo ERBB2 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.