ErbB2/HER2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400138-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ErbB2/HER2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ErbB2/HER2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ErbB2/HER2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ERBB2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ErbB2/HER2 Anticorpo (3B5): sc-33684
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ErbB2/HER2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400138-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ErbB2/HER2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400138-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ERBB2 codifica a tirosina quinase receptora ErbB2/HER2, um membro da família EGFR/ErbB que atua como parceiro preferencial de heterodimerização para amplificar a sinalização de fatores de crescimento. Após a ativação, o HER2 estimula as vias downstream MAPK/ERK e PI3K–AKT–mTOR, que regulam proliferação, sobrevivência, metabolismo e progressão do ciclo celular. A desregulação de ERBB2 está fortemente associada a alterações no tráfego do receptor, sinalização mitogênica sustentada e mudanças em programas de diferenciação epitelial. Consequentemente, ERBB2 é um alvo molecular amplamente utilizado para investigar redes de sinalização oncogênica, crosstalk entre receptores e o redirecionamento de vias em modelos celulares humanos.
ErbB2/HER2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ERBB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ERBB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ERBB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ERBB2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.