Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ERAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429840-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ERAP1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ERAP1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ERAP1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Erap1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ERAP1 Anticorpo (B-10): sc-271823
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ERAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429840-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ERAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-429840-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A ERAP1 de camundongo (Erap1) é uma metalopeptidase de zinco residente no retículo endoplasmático que recorta precursores de peptídeos antigênicos até comprimentos ideais para o carregamento em moléculas de MHC de classe I, moldando o imunopetidoma e o reconhecimento por células T CD8+. Além do processamento de antígenos, a ERAP1 contribui para o controle de qualidade de proteínas no RE e pode influenciar respostas de estresse do RE por meio de suas funções no processamento de peptídeos e na proteostase. Variações na atividade da ERAP1 têm sido associadas à desregulação imune e a fenótipos inflamatórios, tornando a Erap1 um alvo útil para estudar vias de apresentação de antígenos e redes de sinalização imunológica. Em modelos murinos, a perturbação de Erap1 dá suporte a pesquisas mecanísticas sobre processos relevantes para autoimunidade e infecção, sem implicar desfechos clínicos.
ERAP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Erap1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Erap1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Erap1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Erap1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.