EphA10 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-432976-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EphA10O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EphA10 (m) e o Plasmídeo Double Nickase EphA10 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Epha10. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EphA10 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-432976-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EphA10 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-432976-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Epha10 do camundongo codifica o EphA10, um membro da família de receptores tirosina-quinase Eph, que medeia a comunicação célula–célula por meio da ligação a efrinas e da sinalização bidirecional. A sinalização associada ao EphA10 se integra a vias que controlam a remodelação do citoesqueleto, a adesão celular e o comportamento migratório — processos que moldam o padrão dos tecidos e a organização de circuitos neurais. Embora o EphA10 seja frequentemente descrito como um receptor Eph atípico, com atividade quinase alterada, ele pode modular o agrupamento de receptores e redes de sinalização a jusante que influenciam a diferenciação e a homeostase tecidual. A desregulação da sinalização Eph/efrina está amplamente associada a posicionamento celular anômalo e a alterações no controle do crescimento, tornando o Epha10 um alvo útil para estudos mecanísticos em modelos de desenvolvimento, imunidade e biologia do câncer.
EphA10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Epha10 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Epha10. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Epha10. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Epha10 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.