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ENOPH1双切口酶质粒(m) | sc-426793-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ENOPH1双切口酶质粒(m2) | sc-426793-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Enoph1 编码小鼠的 ENOPH1 酶,这是一种代谢相关蛋白,参与细胞内氧化还原与硫醇依赖过程,将细胞能量状态与解毒及应激适应通路联系起来。关于 ENOPH1 活性的讨论常置于谷胱甘肽相关代谢及其相关中间体的背景之下,其下游影响包括氧化应激处理、线粒体功能以及整体代谢稳态。这些过程一旦受到扰动,可能会影响代谢活跃组织中的增殖与存活程序,并与代谢功能障碍及应激相关表型的研究相关。因此,Enoph1 是一个有用的研究靶点,可用于在小鼠模型中解析氧化还原缓冲能力与小分子代谢如何塑造细胞生理状态。
ENOPH1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Enoph1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Enoph1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Enoph1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Enoph1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。