非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Endothelin-3/EDN3/ET-3CRISPR激活质粒(h): sc-404436-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Endothelin-3/EDN3/ET-3 CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- Endothelin-3/EDN3/ET-3 CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 Endothelin-3/EDN3/ET-3 CRISPR 激活质粒 (h) 和 Endothelin-3/EDN3/ET-3 CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 EDN3 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Endothelin-3/EDN3/ET-3: sc-81944，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Endothelin-3/EDN3/ET-3CRISPR激活质粒(h) | sc-404436-ACT | 20 µg | $397.00 |
EDN3 编码内皮素-3（endothelin-3，ET-3），它是一种分泌型、具有血管活性作用的内皮素家族肽类配体，主要通过内皮素B型受体（EDNRB）传递信号，从而调控神经嵴来源细胞的迁移、黑色素细胞谱系的命运决定，以及肠神经系统的发育。ET-3 还可通过 GPCR 介导的通路参与平滑肌张力与血管稳态的旁分泌调控，这些通路涉及磷脂酶C、细胞内钙离子通量以及 MAPK 信号。在发育与组织图式建立的背景下，EDN3–EDNRB 信号与调控增殖和分化的多条通路发生交汇，并在色素细胞生物学中与 WNT 和 KIT 依赖的程序存在串话。EDN3 信号失调与神经嵴发育及色素相关疾病有关，因此也常被用于研究其在胃肠道神经支配以及微环境信号动态中的作用。
Endothelin-3/EDN3/ET-3 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性EDN3的表达。
Endothelin-3/EDN3/ET-3 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的EDN3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于EDN3转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Endothelin-3/EDN3/ET-3表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的EDN3位点，并能够研究内源性位点上依赖于Endothelin-3/EDN3/ET-3的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在EDN3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Endothelin-3/EDN3/ET-3通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。