EMAP II Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420161

Descripción general

Aimp1 codifica EMAP II (polipéptido II activador de monocitos endoteliales), una proteína multifuncional conocida sobre todo como un factor de tipo citocina derivado del componente AIMP1 del complejo multisintetasa de ARNt. EMAP II participa en la señalización de estrés e inflamación, modulando la quimiotaxis de leucocitos, las respuestas endoteliales y la regulación más amplia de procesos de la inmunidad innata. En modelos murinos, la actividad alterada de Aimp1/EMAP II se ha relacionado con vías que controlan la apoptosis, la señalización asociada a la angiogénesis y la remodelación tisular. La desregulación de estos procesos es relevante para estudios de inflamación crónica, la biología del microambiente tumoral-inmunitario y los mecanismos de disfunción vascular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO EMAP II (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Aimp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Aimp1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Aimp1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína EMAP II.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Aimp1 para la investigación de la señalización de EMAP II, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Aimp1 críticos para la función de EMAP II
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Aimp1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido EMAP II CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido EMAP II CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Aimp1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR EMAP II (m) y el plásmido HDR EMAP II (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Aimp1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Aimp1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.