ELOVL3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407282

Descripción general

ELOVL3 (proteína 3 de elongación de ácidos grasos de cadena muy larga) es una elongasa localizada en el retículo endoplásmico que cataliza la extensión de acil-CoA de ácidos grasos saturados y monoinsaturados para generar ácidos grasos de cadena muy larga utilizados en la biosíntesis de lípidos complejos. A través de su función en la elongación de ácidos grasos, ELOVL3 contribuye a la homeostasis lipídica, la composición de membranas y la formación de reservorios de señalización y almacenamiento derivados de lípidos que influyen en el metabolismo celular. La actividad de ELOVL3 se asocia con programas metabólicos lipídicos en tejidos con alto recambio de lípidos, y la desregulación de las vías de elongación se estudia con frecuencia en el contexto de desequilibrios metabólicos y estrés celular asociado a lípidos. Las alteraciones en la composición de ácidos grasos de cadena muy larga pueden afectar la función de los orgánulos y la señalización inflamatoria, lo que convierte a ELOVL3 en un nodo relevante para estudios mecanísticos de fenotipos asociados al metabolismo de lípidos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ELOVL3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ELOVL3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ELOVL3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ELOVL3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ELOVL3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ELOVL3 para la investigación de la señalización de ELOVL3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ELOVL3 críticos para la función de ELOVL3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ELOVL3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ELOVL3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ELOVL3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ELOVL3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ELOVL3 (h) y el plásmido HDR ELOVL3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ELOVL3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ELOVL3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.