Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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eIF2α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400199-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF2αO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase eIF2α (h) e o Plasmídeo Double Nickase eIF2α (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EIF2S1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF2α Anticorpo (D-3): sc-133132
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF2α Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400199-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF2α Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400199-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF2S1 codifica a subunidade alfa do fator eucariótico de iniciação da tradução 2 (eIF2α), um regulador central da iniciação da tradução dependente de cap e um nó-chave na resposta integrada ao estresse (ISR). A fosforilação de eIF2α em Ser51 por quinases responsivas ao estresse, como PERK (EIF2AK3), GCN2 (EIF2AK4), PKR (EIF2AK2) e HRI (EIF2AK1), reduz a disponibilidade do complexo ternário, atenuando globalmente a síntese proteica e, ao mesmo tempo, permitindo programas de tradução seletivos. Esse eixo de sinalização coordena a proteostase, a adaptação ao estresse do RE (retículo endoplasmático), a autofagia e respostas imunes inatas por meio de efetores downstream, incluindo ATF4 e CHOP/DDIT3. A desregulação da sinalização de eIF2α está implicada em contextos como neurodegeneração, tolerância de células tumorais ao estresse, respostas à infecção viral e estresse metabólico, tornando o EIF2S1 uma ferramenta amplamente utilizada para investigar mecanismos de controle translacional.
eIF2α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EIF2S1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EIF2S1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EIF2S1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EIF2S1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.