Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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eIF1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403809
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF1B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico eIF1B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403809 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O EIF1B codifica o fator de iniciação da tradução eucariótica 1B (eIF1B), um pequeno fator de iniciação implicado nas etapas iniciais da iniciação da tradução dependente de cap e na seleção do códon de início, por meio da regulação da dinâmica do complexo de pré-iniciação ribossômico 40S. Ao influenciar o escaneamento e a fidelidade da iniciação, o eIF1B contribui para a homeostase do proteoma e para a resposta celular a sinais de crescimento e ao estresse, que modulam a síntese proteica global. A perturbação de redes de fatores de iniciação da tradução é frequentemente associada a programas alterados de proliferação celular e a vias de adaptação ao estresse, processos comumente investigados na biologia do câncer e na pesquisa em neurodesenvolvimento. Assim, o EIF1B é relevante para estudos mecanísticos que conectam o controle translacional à reprogramação da expressão gênica em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO eIF1B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene EIF1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do EIF1B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do EIF1B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína eIF1B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de EIF1B para a investigação da sinalização de eIF1B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) EIF1B críticos para a função eIF1B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos EIF1B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo eIF1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo eIF1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus EIF1B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo eIF1B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR eIF1B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia EIF1B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo EIF1B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.