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EF-1 α2双切口酶质粒(h) | sc-401444-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EF-1 α2双切口酶质粒(h2) | sc-401444-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EEF1A2 编码真核翻译延长因子 1α2(EF-1α2),这是一种 GTP 结合蛋白,在 mRNA 翻译延长过程中将氨酰化 tRNA 递送至核糖体 A 位点。EF-1α2 参与翻译调控、蛋白质稳态(proteostasis)以及细胞应激反应;此外,鉴于 EF1A 家族成员已被报道具有与肌动蛋白相关的功能,它还与细胞骨架组织存在一定关联。在人体组织中,EEF1A2 在神经元和肌肉中表达更为丰富,并且对维持分化细胞的高蛋白质合成能力十分重要。EEF1A2 的失调或遗传改变与神经发育相关表型以及癌症相关的转录程序有关,因此它是研究依赖翻译的细胞状态重塑的一个有价值节点。
EF-1 α2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EEF1A2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EEF1A2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EEF1A2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EEF1A2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。