Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
EDG-2 Antibody (B-10) Alexa Fluor® 647: sc-515665 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of EDG-2 expression in NIH/3T3 (A), HeLa (B), U-87 MG (C) and PC-3 (D) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Cruz Marker™ Molecular Weight Standards detected with Cruz Marker™ MW Tag-Alexa Fluor® 488: sc-516790.
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EDG-2双切口酶质粒(h): sc-402843-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EDG-2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- EDG-2双切酶质粒（h）和EDG-2双切酶质粒（h2）编码针对LPAR1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EDG-2: sc-515665，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EDG-2双切口酶质粒(h) | sc-402843-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EDG-2双切口酶质粒(h2) | sc-402843-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LPAR1（EDG-2）编码一种溶血磷脂酸（LPA）的G蛋白偶联受体，主要与Gαi/o、Gαq/11和Gα12/13偶联，从而调控Rho/ROCK信号、磷脂酶C依赖的钙离子通量，以及MAPK/ERK和PI3K/AKT通路。通过这些级联反应，EDG-2影响细胞骨架重塑、细胞迁移、增殖与存活，并调节血管通透性和炎症信号传导。LPAR1的活性可整合细胞外基质与基质微环境中的脂质介质信号，进而塑造成纤维细胞的激活状态以及免疫细胞的迁移与归巢。LPA–LPAR1信号失调与纤维化重塑、癌细胞侵袭及转移相关行为，以及神经炎症过程有关，因此在疾病相关模型的机制研究中常被作为重要靶点。
EDG-2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 LPAR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LPAR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏LPAR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了LPAR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。