Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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E2F-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406972
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- E2F-8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico E2F-8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:E2F-8 Anticorpo (B-9): sc-514064
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
E2F-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406972 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
E2F8 codifica o E2F-8, um membro atípico da família de fatores de transcrição E2F que atua principalmente como represssor transcricional, controlando a progressão do ciclo celular e o momento da replicação do DNA. O E2F-8 participa de redes reguladas por RB/E2F, coordena a expressão gênica da fase S e contribui para a manutenção da estabilidade genômica por meio da regulação de programas proliferativos. Ele desempenha papéis no controle do crescimento durante o desenvolvimento e em decisões de destino celular, e a expressão alterada de E2F8 tem sido associada à proliferação desregulada observada em múltiplos contextos de câncer. Como o E2F-8 se conecta a vias centrais de checkpoints e de processos associados à replicação, ele é um nó útil para estudar o controle transcricional da entrada no ciclo celular e as respostas ao estresse replicativo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO E2F-8 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene E2F8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do E2F8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do E2F8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína E2F-8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de E2F8 para a investigação da sinalização de E2F-8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) E2F8 críticos para a função E2F-8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos E2F8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo E2F-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo E2F-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus E2F8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo E2F-8 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR E2F-8 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia E2F8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo E2F8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.