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E2F-6双切口酶质粒(h) | sc-403615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
E2F-6双切口酶质粒(h2) | sc-403615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
E2F6 编码 E2F-6,这是一种非典型的 E2F 家族转录抑制因子,缺乏转录激活结构域,并参与调控细胞周期基因表达的基因沉默程序。E2F-6 参与 RB/E2F 网络的调控,并与多梳(Polycomb)相关的抑制复合体作用,从而在 E2F 响应型启动子处限制转录。通过这些活动,它会影响 S 期进入、与复制相关的转录程序,以及增殖状态的维持。E2F6 表达失调或 E2F-6 介导的抑制作用异常,与多种癌症背景下观察到的增殖表型相关,目前也在研究其在致癌性转录调控回路中的作用。
E2F-6 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 E2F6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对E2F6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏E2F6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了E2F6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。