Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DUSP18 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405897
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DUSP18 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico DUSP18, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DUSP18 Antibody (E-2): sc-376923
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DUSP18 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-405897 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
La fosfatasi a doppia specificità 18 (DUSP18) è un membro della famiglia delle DUSP atipiche che defosforila residui di fosfoserina/treonina e fosfotirosina per modulare la segnalazione guidata dalle chinasi. È stata collegata alla regolazione del tono della via MAPK e a processi più ampi di risposta cellulare allo stress che influenzano proliferazione, sopravvivenza e funzione mitocondriale. Modellando le reti di segnalazione dipendenti dalla fosforilazione, DUSP18 può influenzare programmi trascrizionali e l’omeostasi metabolica in modo dipendente dal contesto. Un’alterata attività fosfatasica in questa classe di regolatori è rilevante per patologie caratterizzate da segnalazione disregolata, inclusi cancro e fenotipi infiammatori o metabolici, rendendo DUSP18 un nodo utile per l’interrogazione delle vie di segnalazione.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO DUSP18 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene DUSP18 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del DUSP18 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto DUSP18 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina DUSP18.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di DUSP18 per lo studio della segnalazione di DUSP18, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni DUSP18 critici per la funzione di DUSP18
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di DUSP18 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal DUSP18 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal DUSP18 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus DUSP18. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal DUSP18 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR DUSP18 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia DUSP18 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio DUSP18 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.