Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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dsg1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401442-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- dsg1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase dsg1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase dsg1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DSG1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:dsg1 Anticorpo (B-11): sc-137164
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
dsg1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401442-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
dsg1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401442-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A desmogleína-1 (DSG1; dsg1) é uma caderina desmossomal dependente de cálcio que medeia uma forte adesão célula–célula em epitélios estratificados, ajudando a organizar a montagem dos desmossomos e a manter a integridade da barreira epidérmica. Ao acoplar-se à plakoglobina, às plakofilinas e à desmoplaquina, a DSG1 conecta as junções intercelulares à rede de filamentos intermediários de queratina e sustenta a resistência do tecido sob estresse mecânico. A função da DSG1 se cruza com programas de diferenciação epitelial e processos de remodelamento juncional que influenciam a sinalização por vias como EGFR/MAPK e as respostas a estímulos inflamatórios. Alterações na expressão ou na função de DSG1 estão associadas a defeitos da barreira cutânea e a fenótipos de bolhosidade e queratodermia relacionados a desmossomos, tornando-a um alvo relevante para estudos mecanísticos de adesão e homeostase epidérmica.
dsg1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DSG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DSG1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DSG1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DSG1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.