DSCR 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402694

Visão geral

RCAN1 (DSCR1) codifica uma proteína que interage com a calcineurina e atua como regulador endógeno da sinalização dependente de Ca2+, modulando a atividade fosfatase da calcineurina. Por meio dessa interação, a DSCR1 influencia programas transcricionais conduzidos por NFAT que governam respostas ao estresse, crescimento celular e diferenciação, e também se conecta a vias de MAPK e de estresse oxidativo. A expressão de RCAN1 responde a estressores celulares e à sinalização por citocinas, vinculando-a ao controle dinâmico de saídas transcricionais em múltiplos tecidos. A atividade desregulada de RCAN1 tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e a alterações na sinalização vascular e imune, oferecendo uma base mecanística para estudar desequilíbrios de vias em contextos relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DSCR 1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RCAN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RCAN1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RCAN1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DSCR 1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RCAN1 para a investigação da sinalização de DSCR 1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RCAN1 críticos para a função DSCR 1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RCAN1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo DSCR 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DSCR 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RCAN1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo DSCR 1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DSCR 1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RCAN1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RCAN1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.