Dpl CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403482

개요

PRND는 인간 Doppel(Dpl) 단백질을 암호화하며, Dpl은 프리온 단백질 계열에 속하는 글리코실포스파티딜이노시톨(GPI) 결합형 막 당단백질로서 세포 표면과 분비 경로의 구획에 위치합니다. Dpl은 신경 및 생식 생물학과 연관되어 왔으며, 세포–세포 상호작용, 산화 스트레스 반응, 생존 신호 조절에서의 역할이 보고되었습니다. 또한 미토콘드리아 기능과 산화환원 항상성에 영향을 미치는 경로들과 교차하는 것으로 알려져 있습니다. 비정상적인 PRND/Dpl 발현은 여러 악성종양에서 관찰되었고, 분화 상태 변화와 침습성의 표지자로서 탐색되어 왔으며, 이는 종양 세포 표현형에 대한 PRND의 기여를 규명하려는 연구의 근거가 됩니다. 신경계 맥락에서 프리온 계열 단백질은 단백질 품질 관리와 신경퇴행 관련 과정과도 연관되므로, PRND는 막 연관 신호전달과 스트레스 적응의 기전을 연구하는 데 유용한 결절점이 됩니다.

Dpl CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PRND 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PRND 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PRND의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Dpl 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Dpl 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PRND 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Dpl 기능에 중요한 PRND 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PRND 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Dpl CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Dpl CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PRND 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Dpl HDR 플라스미드 (h) 및 Dpl HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PRND 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PRND 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.