Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Dok-3双切口酶质粒(m): sc-424217-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Dok-3 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Dok-3双切酶质粒（m）和Dok-3双切酶质粒（m2）编码针对Dok3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Dok-3: sc-390007，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Dok-3双切口酶质粒(m) | sc-424217-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dok-3双切口酶质粒(m2) | sc-424217-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Dok3 编码 Dok-3，它是 downstream of kinase（DOK）家族的一种衔接蛋白（adaptor protein），可调控造血与免疫细胞中受体近端（receptor-proximal）的信号传导。Dok-3 通过组装信号复合体参与 B 细胞受体（BCR）和 Fc 受体通路，影响 Src 家族激酶、Syk 依赖性级联反应以及 MAPK/ERK 输出，从而塑造细胞激活阈值与细胞因子应答。凭借其支架功能（scaffolding function），Dok-3 还参与先天与适应性免疫信号的调控，包括髓系谱系中与 Toll 样受体（TLR）相关的应答。DOK3 相关信号的失调与免疫功能障碍和炎症表型有关，因此 Dok-3 常被用作免疫学与造血细胞生物学机制研究的靶点。
Dok-3 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Dok3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Dok3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Dok3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Dok3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。