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Dok-3双切口酶质粒(h) | sc-404131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dok-3双切口酶质粒(h2) | sc-404131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DOK3 编码 Dok-3,这是一种衔接蛋白(adaptor protein),可调控造血细胞中免疫受体下游的信号传导,尤其参与 B 细胞受体(BCR)和 Fc 受体通路。Dok-3 通过其 PH 与 PTB 结构域介导的相互作用,帮助组织信号复合体,从而塑造磷酸化级联反应,并影响 MAPK 与 NF-κB 通路的输出。通过调节激活阈值、钙离子通量以及细胞因子应答,Dok-3 有助于维持免疫稳态并调控炎症程序。研究中发现,DOK3 的表达或信号异常与免疫失衡及炎症相关疾病机制有关,因此对先天与适应性免疫信号网络的研究具有重要意义。
Dok-3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DOK3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DOK3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DOK3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DOK3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。